在开始进入正题前，我们需要有一些“基础知识”的储备，先来一起看看吧！

胚胎的发育过程

胚胎发育是一个动态变化过程。

我们以体外受精进行体外培养的胚胎为例：

我们通常定义取卵日为第0天，媒精或单精子显微注射后精子与卵子结合形成受精卵。

取卵后第1-3天(D1-D3)如果受精卵卵裂，我们将其称为卵裂期胚胎。

取卵后第4天(D4)胚胎继续卵裂并出现卵裂球间的融合，胚胎的形状呈“桑葚”状，称为桑葚胚。

取卵后第5-7天(D5-D7）.胚胎继续卵裂，细胞数增加之后，发生细胞分化，形成外胚滋养层（将来形成胎盘和绒毛羊膜等妊娠组织）及内细胞团（将来发育成胎儿），胚胎中央出现腔体，此阶段的胚胎称为囊胚。

什么是透明带？

透明带是环绕在人类卵母细胞和早期胚胎外周的细胞结构，由糖蛋白、碳水化合物和透明带特种蛋白构成。透明带分为两层，外层较厚但结构松散，精子易穿透;内层较薄但结构致密，精子不易穿透。

透明带的作用

透明带类似于“蛋壳”，作为一种物理屏障，既能保护卵子或早期胚胎的完整性与整体性，又能避免多精子受精，而且还能保护胚胎不受细菌和免疫细胞的攻击。

自然孵化的过程

卵母细胞和初期胚胎被透明带包裹,当胚胎发育到囊胚阶段，随着细胞的增殖，囊胚的内腔变大，透明带变薄，囊胚发育成为扩张期囊胚。

这时胚胎、输卵管上皮及子宫内膜上皮会分泌溶解透明带的分泌因子(胰蛋白酶活性物质溶解素)，胚胎内部压力逐渐增加，囊胚经过多次周期性的收缩膨胀，透明带变得更软更薄，胚胎从透明带中“破壳”而出。脱出的胚胎滋养外胚层细胞与子宫内膜细胞接触后，胚胎定位→着床→植入于子宫内膜。胚胎想要着床，先要顺利地孵出。

自然孵化的时期

一般在受精后的第5-7天左右自然孵化。

▶ 什么是辅助孵化？

辅助孵化术(AH , assisted hatching)，是通过物理或化学方法，打薄或切开透明带的一部分，以辅助胚胎从透明带中脱出，增加着床的可能性提高妊娠率的一种显微操作技术。

▶ 为什么要辅助孵化？

小鸡必须用自己的嘴啄破蛋壳出来。如果蛋壳太硬或者太厚，很难啄破，那小鸡就有麻烦了！人类的胚胎也有同样的情况。如果透明带太厚、太硬，囊胚有时无法靠自身的力量完成孵出过程，就会导致植入子宫内膜困难，从而使种植失败。这时就需要用人工的技术方式帮助胚胎完成孵化过程。

▶ 辅助孵化术的常用方法

有三种方法：机械法、化学法和激光法，其中机械法和化学法在临床应用最早，但由于机械法和化学法缺点较多，目前临床上广泛使用的方法是激光法。

机械法

机械法是在显微操作下，使用显微辅助孵化针切割透明带，需要技术熟练。

化学法

化学法是用酸性台氏液（pH 2.5）等强酸性溶液将透明带一部分溶解，透明带为双层结构，外层厚但易溶解，内层薄呈膜状但不易被溶解。由于是强酸性溶液，可能会对胚胎产生影响。

激光法

激光法是使用激光束在透明带上打孔或削薄。操作简便、快速、精准性高，而且不会对胚胎造成过多的负担。

▶什么阶段的胚胎适合辅助孵化？

卵裂期胚胎卵裂球间结合不紧密，透明带会保护胚胎实质部分免受外部环境的影响，防止卵裂球的散落，如全部移除透明带，则失去透明带对胚胎的保护作用。所以建议对囊胚进行人工辅助孵化。卵裂期胚胎如需进行辅助孵化，仅是打薄，而不是全部移除透明带。

▶ 辅助孵化的适应症

高龄，基础卵泡刺激素高值女性

随着女性年龄增加、卵泡刺激素（FSH）水平升高易导致透明带过厚、过硬或者畸形，造成胚胎自然孵化困难。

注意：高龄女性助孕成功率低的原因多为卵母细胞的染色体异常，所以人工辅助孵化并非“万能”。

透明带异常

透明带形态不规则、着色深、透明带增厚等，这提示透明带变硬或有某种功能上的缺陷，可能会导致囊胚孵出困难，影响胚胎着床。

发育速度迟缓的胚胎

发育速度迟缓的胚胎，其自然孵化能力常较弱，人工辅助孵化术可以缩短着床时间，有助于胚胎保持与子宫内膜植入窗口开放时间的一致性，提高胚胎移植的种植率。

IVF治疗反复不成功病例

体外受精治疗反复不成功的病例中，有一部分可能是自然孵化失败导致，所以可以尝试辅助孵化。

冻融胚胎

胚胎经过冷冻和融解后透明带变硬，失去弹性，导致孵出困难。

▶ 实施时期及安全性

冷冻囊胚时，目前大多数使用玻璃化冷冻法，先将囊胚脱水，然后冷冻保存，囊胚融解时，囊胚处于脱水状态，透明带部分和内部细胞部分之间出现了较大的间隙，或者在囊胚的收缩期（皱缩期），这时用激光切割透明带可以避免损坏内部细胞。

小结

▶ 人类胚胎也需要“破壳”。

▶ 辅助孵化可以辅助胚胎从透明带中脱出，提高临床种植率。

▶ 激光法操作简便、快速、精准性高。

▶ 临床上多用于冻融囊胚移植，可以提升高龄、透明带异常、胚胎发育迟缓以及反复试管失败病例的种植率。

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